膜蛋白作為復(fù)雜性功能蛋白,在物質(zhì)運輸、信號傳導(dǎo)、能量轉(zhuǎn)換及細胞增殖分化中發(fā)揮著重要作用,基于上述膜蛋白在細胞中的各種功能,膜蛋白一直是各研究方向的熱點。
目前,在藥物研發(fā)中,一半以上的藥物靶點都是膜蛋白。但是由于膜蛋白結(jié)構(gòu)特點,在研究中的重組表達上一直是一個難點,而具體多種原因包括以下幾點:
膜蛋白定位:膜蛋白功能的正確行使,和其正確定位有著必要的關(guān)系,但是要保證膜蛋白的天然構(gòu)象及正確的靶向和插入細胞膜是具有很大的難度;
跨膜蛋白疏水性:因為跨膜蛋白具有疏水區(qū)域,是它們能夠穩(wěn)定的嵌入細胞膜中,所以水環(huán)境中的蛋白表達出現(xiàn)錯誤折疊或聚集沉淀的問題;
蛋白質(zhì)毒性:在跨膜蛋白大量表達時,因疏水區(qū)域問題,可能會出現(xiàn)大量錯誤折疊或未折疊的蛋白,而這些蛋白在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的積累會激活細胞應(yīng)急反應(yīng),導(dǎo)致細胞死亡;
天然表達水平低:某些膜蛋白在天然表達水平上非常低,所以后續(xù)的純化和檢測難度較大,重復(fù)困難,增加時間成本。
案例一
案例二
無細胞蛋白表達技術(shù)可以很好的解決上述中膜蛋白表達的問題,此技術(shù)是在體外實現(xiàn)DNA到蛋白質(zhì)的轉(zhuǎn)錄翻譯過程,反應(yīng)體系中包括轉(zhuǎn)錄翻譯所必需的元件、物質(zhì)和能量,并且我們會根據(jù)不同蛋白質(zhì)特點構(gòu)建不同的體外反應(yīng)體系,確保目的蛋白的正確表達與折疊。如上圖所示,在我們的預(yù)實驗中,四次跨膜蛋白及七次跨膜蛋白使用無細胞蛋白表達體系表達,加入特殊配置的輔助分子試劑后,在上清液中得到了可溶性的目的蛋白,且產(chǎn)量水平清晰可見。
所以,我們相信無細胞蛋白表達技術(shù)能夠助您在蛋白表達研究中更高效快捷。
珀羅汀生物于2017年在蘇州工業(yè)園區(qū)成立,是一家專業(yè)的無細胞蛋白表達生物技術(shù)公司。公司擁有國家高層次人才、海歸博士等人才組成的專業(yè)技術(shù)團隊,以自主研發(fā)具特色的無細胞蛋白表達技術(shù)平臺為依托,為廣大生物醫(yī)藥、合成生物學(xué)等企業(yè)、研究機構(gòu)提供無細胞蛋白表達產(chǎn)品、蛋白原料試劑及定制化服務(wù)。
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